雙光束紫外可見分光光度計主要由光源系統(tǒng)、單色器系統(tǒng)、樣品室、檢測系統(tǒng)組成。光源發(fā)出的復(fù)合光通過單色器被分解成單色光,當(dāng)單色光通過樣品室時,一部分被樣品吸收,其余未被吸收的光到達(dá)檢測器,被轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?,?jīng)電子電路的放大和數(shù)據(jù)處理后,通過顯示系統(tǒng)給出測量結(jié)果。
雙光束紫外可見分光光度計在不同情況下的應(yīng)用:
1、與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照
將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì),則兩者的光譜圖應(yīng)*一致。如果沒有標(biāo)樣,也可以和現(xiàn)成的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對照進(jìn)行比較。這種方法要求儀器準(zhǔn)確,精密度高,且測定條件要相同。
2、檢定物質(zhì)
根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是大吸收波長λmax和摩爾吸收系數(shù)ε,是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。
3、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定
金屬離子常與有機物形成絡(luò)合物,多數(shù)絡(luò)合物在紫外可見區(qū)是有吸收的,我們可以利用分光光度法來研究其組成。
4.反應(yīng)動力學(xué)研究
借助于分光光度法可以得出一些化學(xué)反應(yīng)速度常數(shù),并從兩個或兩個以上溫度條件下得到的速度數(shù)據(jù),得出反應(yīng)活化能。
5.純度檢驗
紫外吸收光譜能測定化合物中含有微量的具有紫外吸收的雜質(zhì)。如果化合物的紫外可見光區(qū)沒有明顯的吸收峰,而它的雜質(zhì)在紫外區(qū)內(nèi)有較強的吸收峰,就可以檢測出化合物中的雜質(zhì)。
6.氫鍵強度的測定
不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同,這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度,以確定選擇哪一種溶劑。
7、比較較大吸收波長吸收系數(shù)的一致性
由于紫外吸收光譜只含有2~3個較寬的吸收帶,而紫外光譜主要是分子內(nèi)的發(fā)色團在紫外區(qū)產(chǎn)生的吸收,與分子和其它部分關(guān)系不大。具有相同發(fā)色團的不同分子結(jié)構(gòu),在較大分子中不影響發(fā)色團的紫外吸收光譜,不同的分子結(jié)構(gòu)有可能有相同的紫外吸收光譜,但它們的吸收系數(shù)是有差別的。如果分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸收波長相同,吸收系數(shù)也相同,則可認(rèn)為分析樣品與標(biāo)準(zhǔn)樣品為同一物質(zhì)。